第34章 實驗繼續
菲布理採血結束後大概過了半個多小時。
蛋白質沉澱在負二十度的冰箱裡待夠了時間,莫忘把離心管取出來,拿到操作台前開始處理。
LC-MS/MS的控制終端上,調出非靶向代謝組學的分析方法文件。
色譜柱是ACQUITY BEH C18,2.1乘100毫米,1.7微米粒徑。
流動相A用含百分之零點一甲酸的水,B用含百分之零點一甲酸的乙腈,梯度洗脫從百分之五B開始線性升到百分之九十五B,整個運行時間十八分鐘。
質譜那邊設的ESI正負離子交替掃描,掃描範圍設定好,碰撞能量分了三檔,自動觸發MS/MS採集。
莫忘檢查完所有參數,按下了開始鍵。
UHPLC的泵啟動了。
管路里的流動相無聲地流動起來,進樣針從小瓶中吸取了兩微升樣品,精確地注入色譜柱。
虛擬屏幕上,總離子流色譜圖開始實時繪製。
橫軸是保留時間,縱軸是信號強度,隨著梯度洗脫的推進,色譜峰一個接一個地冒了出來,密密麻麻地排列在時間軸上。
莫忘的眼睛掃過每一個峰。
大部分峰的保留時間和質荷比都落在標準人類血漿代謝物資料庫的範圍之內,正常,正常,還是正常。
但是到了第三分鐘附近的時候,一組雙峰讓他的目光停住了。
峰形尖銳,強度不低,兩個峰挨得很近但分離度足夠,各自獨立。
他在記錄本上飛快地寫下保留時間和初步估算的分子量範圍,畫了個圈,又打了個星號。
「桔梗。」
「3分15秒處有一組異常雙峰,你流式那邊跑完了先過來看一下」
「知道了,還差一點。」
芳川桔梗的聲音從隔壁傳過來。
莫忘沒等她過來,已經從第二支綠色蓋管中吸了十微升血漿出來,注進了CE-MS系統。
毛細管電泳的分離原理和液相色譜完全不同。
液相色譜靠的是分子和固定相之間的親疏遠近,而毛細管電泳靠的是電荷和質量的比值。
莫忘在背景電解質里額外加了硫酸化β-環糊精。
這東西是個手性選擇子,能把結構完全相同但空間構型互為鏡像的兩種分子拆開。
說白了就是左手和右手的區別,分子式一模一樣,但是鏡像翻轉過來就對不上了。
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人體裡的胺基酸幾乎清一色都是L-型的,也就是所謂的天然構型。
如果菲布理的血液里跑出了D-型胺基酸,那只能說明一件事情。
她體內的代謝系統里有非天然合成的產物在流通。
CE-MS啟動之後,莫忘又轉頭看了一眼操作台最右邊的全自動生化分析平台。
離心好的血清樣品已經在處理了,常規生化全套自動跑著,屏幕上一項一項的結果正在往外蹦。
莫忘在開放式模塊里加塞了三組自定義項目,游離胺基酸譜、血氨濃度精確定量、還有α-酮酸含量,都在排隊等著進檢測通道。
三台設備同時運轉。
「布束,穿刺活檢那邊你處理一下。」
「好的,老師。」
布束砥信從器材包里拿出了穿刺活檢針。
兩毫米直徑的細管狀工具看上去並不嚇人,但菲布理顯然不這麼認為。
她坐在凳子上一直盯著布束砥信手裡那根東西看,紫色的大眼睛瞪得圓圓的。
布束砥信蹲到菲布理面前,握住她的左手輕輕翻過來,露出左前臂內側那片白嫩的皮膚。
碘伏消毒的時候菲布理的手指抖了一下,但沒有縮回去。
布束砥信動作很輕,棉簽在皮膚上畫了個小圓圈,棕黃色的碘液暈開。
然後她從托盤上拿起注射器。
「小小的一下,打完就不疼了。」
零點一毫升利多卡因推進了皮下組織。
「不疼了欸……」
布束砥信拿起穿刺活檢針,對準消毒好的位置,旋轉進針。
菲布理的眼睛一直死死盯著自己的手臂。
圓柱形的穿刺針旋轉著取下了一小塊皮膚組織,直徑兩毫米,深度兩毫米左右。
布束砥信拔出穿刺針,用鑷子把那塊針尖大小的樣本轉移到預裝好保存液的凍存管中,擰緊蓋子擱到冰盒裡。
「好了,結束了。」
桔梗從托盤上撕開一片無菌敷料,貼在穿刺點上,用指腹輕輕壓了兩下邊緣確保貼合。
採樣工作全部結束了。
莫忘坐在椅子上,翹著二郎腿,視線在三台設備的屏幕之間來回移動。
LC-MS/MS的非靶向代謝組學數據還在持續採集,保留時間軸上又冒出了幾個新峰,他掃了一眼,暫時沒看到第二組明顯異常的信號。
CE-MS那邊的手性胺基酸分離剛剛進入穩定運行階段,電泳圖上還是一片平坦的基線。
生化平台的常規指標倒是已經蹦出來大半了。
那組異常雙峰的精確分子式還得再等。
桔梗回到隔壁工位,開始整理流式細胞儀跑出來的免疫細胞初步數據,屏幕上花花綠綠的散點圖一片一片地翻過去。
布束砥信從雜物間倒了一杯溫水出來遞給菲布理,菲布理雙手捧著杯子喝了兩口,放下杯子之後靠到了布束砥信的肩膀上。
菲布理的眼皮慢慢耷拉了下來。
小孩子嘛,精力來的快去的也快。
再加上本來晚上就沒睡幾個小時。
實驗室重新安靜了下來。
也不知道過了多久,門口傳來敲門聲。
布束砥信輕輕扶住菲布理的腦袋讓她靠在椅背上,然後起身去開了門。
門口是佐天淚子,看到開門的是布束砥信之後打了聲招呼,然後探著頭往實驗室裡面看了一眼。
「菲布理!我來接你啦!」
(佐天淚子)
菲布理迷迷糊糊地睜開眼睛。
兩根呆毛先動了,彈了起來,然後她才看清門口那張笑臉,然後從椅子上滑了下來,抱著愛心小包蹬蹬蹬地跑向門口。
跑到門檻的時候她停了一下。
轉過身,看向實驗室裡面。
莫忘背對著她,坐在操作台前面盯著屏幕上緩緩滾動的色譜數據。
菲布理低下頭思考了一下,然後抬起頭。
「大哥哥,那等會再見。」
莫忘沒注意,思緒已經完全沉浸在了數據中。
菲布理笑了一下,轉身抓住佐天淚子的手,蹬蹬蹬地跑遠了。
布束砥信看著兩人離開的背影,回頭看向莫忘,有點不知道怎麼開口。
「行了,你要是想去也跟著去吧。」
莫忘的聲音,突然傳來。
布束砥信猶豫了一下,點了點頭,拉開門跟著跑了出去。
門重新合上。
實驗室里只剩下設備運轉的聲音。
桔梗從屏幕前探出頭來。
「莫忘,你不跟著去嗎?這邊我看著就行了吧?」
「這話說得,我有什麼一定要去的理由嗎?再說了,現在還是這個比較重要吧?剩下的交給她們就行了。」
蛋白質沉澱在負二十度的冰箱裡待夠了時間,莫忘把離心管取出來,拿到操作台前開始處理。
LC-MS/MS的控制終端上,調出非靶向代謝組學的分析方法文件。
色譜柱是ACQUITY BEH C18,2.1乘100毫米,1.7微米粒徑。
流動相A用含百分之零點一甲酸的水,B用含百分之零點一甲酸的乙腈,梯度洗脫從百分之五B開始線性升到百分之九十五B,整個運行時間十八分鐘。
質譜那邊設的ESI正負離子交替掃描,掃描範圍設定好,碰撞能量分了三檔,自動觸發MS/MS採集。
莫忘檢查完所有參數,按下了開始鍵。
UHPLC的泵啟動了。
管路里的流動相無聲地流動起來,進樣針從小瓶中吸取了兩微升樣品,精確地注入色譜柱。
虛擬屏幕上,總離子流色譜圖開始實時繪製。
橫軸是保留時間,縱軸是信號強度,隨著梯度洗脫的推進,色譜峰一個接一個地冒了出來,密密麻麻地排列在時間軸上。
莫忘的眼睛掃過每一個峰。
大部分峰的保留時間和質荷比都落在標準人類血漿代謝物資料庫的範圍之內,正常,正常,還是正常。
但是到了第三分鐘附近的時候,一組雙峰讓他的目光停住了。
峰形尖銳,強度不低,兩個峰挨得很近但分離度足夠,各自獨立。
他在記錄本上飛快地寫下保留時間和初步估算的分子量範圍,畫了個圈,又打了個星號。
「桔梗。」
「3分15秒處有一組異常雙峰,你流式那邊跑完了先過來看一下」
「知道了,還差一點。」
芳川桔梗的聲音從隔壁傳過來。
莫忘沒等她過來,已經從第二支綠色蓋管中吸了十微升血漿出來,注進了CE-MS系統。
毛細管電泳的分離原理和液相色譜完全不同。
液相色譜靠的是分子和固定相之間的親疏遠近,而毛細管電泳靠的是電荷和質量的比值。
莫忘在背景電解質里額外加了硫酸化β-環糊精。
這東西是個手性選擇子,能把結構完全相同但空間構型互為鏡像的兩種分子拆開。
說白了就是左手和右手的區別,分子式一模一樣,但是鏡像翻轉過來就對不上了。
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人體裡的胺基酸幾乎清一色都是L-型的,也就是所謂的天然構型。
如果菲布理的血液里跑出了D-型胺基酸,那只能說明一件事情。
她體內的代謝系統里有非天然合成的產物在流通。
CE-MS啟動之後,莫忘又轉頭看了一眼操作台最右邊的全自動生化分析平台。
離心好的血清樣品已經在處理了,常規生化全套自動跑著,屏幕上一項一項的結果正在往外蹦。
莫忘在開放式模塊里加塞了三組自定義項目,游離胺基酸譜、血氨濃度精確定量、還有α-酮酸含量,都在排隊等著進檢測通道。
三台設備同時運轉。
「布束,穿刺活檢那邊你處理一下。」
「好的,老師。」
布束砥信從器材包里拿出了穿刺活檢針。
兩毫米直徑的細管狀工具看上去並不嚇人,但菲布理顯然不這麼認為。
她坐在凳子上一直盯著布束砥信手裡那根東西看,紫色的大眼睛瞪得圓圓的。
布束砥信蹲到菲布理面前,握住她的左手輕輕翻過來,露出左前臂內側那片白嫩的皮膚。
碘伏消毒的時候菲布理的手指抖了一下,但沒有縮回去。
布束砥信動作很輕,棉簽在皮膚上畫了個小圓圈,棕黃色的碘液暈開。
然後她從托盤上拿起注射器。
「小小的一下,打完就不疼了。」
零點一毫升利多卡因推進了皮下組織。
「不疼了欸……」
布束砥信拿起穿刺活檢針,對準消毒好的位置,旋轉進針。
菲布理的眼睛一直死死盯著自己的手臂。
圓柱形的穿刺針旋轉著取下了一小塊皮膚組織,直徑兩毫米,深度兩毫米左右。
布束砥信拔出穿刺針,用鑷子把那塊針尖大小的樣本轉移到預裝好保存液的凍存管中,擰緊蓋子擱到冰盒裡。
「好了,結束了。」
桔梗從托盤上撕開一片無菌敷料,貼在穿刺點上,用指腹輕輕壓了兩下邊緣確保貼合。
採樣工作全部結束了。
莫忘坐在椅子上,翹著二郎腿,視線在三台設備的屏幕之間來回移動。
LC-MS/MS的非靶向代謝組學數據還在持續採集,保留時間軸上又冒出了幾個新峰,他掃了一眼,暫時沒看到第二組明顯異常的信號。
CE-MS那邊的手性胺基酸分離剛剛進入穩定運行階段,電泳圖上還是一片平坦的基線。
生化平台的常規指標倒是已經蹦出來大半了。
那組異常雙峰的精確分子式還得再等。
桔梗回到隔壁工位,開始整理流式細胞儀跑出來的免疫細胞初步數據,屏幕上花花綠綠的散點圖一片一片地翻過去。
布束砥信從雜物間倒了一杯溫水出來遞給菲布理,菲布理雙手捧著杯子喝了兩口,放下杯子之後靠到了布束砥信的肩膀上。
菲布理的眼皮慢慢耷拉了下來。
小孩子嘛,精力來的快去的也快。
再加上本來晚上就沒睡幾個小時。
實驗室重新安靜了下來。
也不知道過了多久,門口傳來敲門聲。
布束砥信輕輕扶住菲布理的腦袋讓她靠在椅背上,然後起身去開了門。
門口是佐天淚子,看到開門的是布束砥信之後打了聲招呼,然後探著頭往實驗室裡面看了一眼。
「菲布理!我來接你啦!」
(佐天淚子)
菲布理迷迷糊糊地睜開眼睛。
兩根呆毛先動了,彈了起來,然後她才看清門口那張笑臉,然後從椅子上滑了下來,抱著愛心小包蹬蹬蹬地跑向門口。
跑到門檻的時候她停了一下。
轉過身,看向實驗室裡面。
莫忘背對著她,坐在操作台前面盯著屏幕上緩緩滾動的色譜數據。
菲布理低下頭思考了一下,然後抬起頭。
「大哥哥,那等會再見。」
莫忘沒注意,思緒已經完全沉浸在了數據中。
菲布理笑了一下,轉身抓住佐天淚子的手,蹬蹬蹬地跑遠了。
布束砥信看著兩人離開的背影,回頭看向莫忘,有點不知道怎麼開口。
「行了,你要是想去也跟著去吧。」
莫忘的聲音,突然傳來。
布束砥信猶豫了一下,點了點頭,拉開門跟著跑了出去。
門重新合上。
實驗室里只剩下設備運轉的聲音。
桔梗從屏幕前探出頭來。
「莫忘,你不跟著去嗎?這邊我看著就行了吧?」
「這話說得,我有什麼一定要去的理由嗎?再說了,現在還是這個比較重要吧?剩下的交給她們就行了。」